MỘT SỐ TIP VỀ TỐI ƯU HÓA ELISA 

Thông thường, tối ưu hóa các thành phần xét nghiệm ELISA (kháng thể, chất đệm, mẫu) được thực hiện bằng cách thử nghiệm các giải pháp khác nhau để xác định nồng độ làm việc lý tưởng cho từng thành phần. Đối với kháng thể bắt giữ, pha loãng trong dung dịch đệm trong khoảng từ 5 đến 15 µg/ml đối với các kháng thể chưa được lọc và 1 đến 12 µg/ml đối với các kháng thể có ái lực đã được chuẩn bị. Các kháng thể có ái lực được tinh chế được khuyến nghị cho tỷ lệ nhiễu tín hiệu tối ưu. Mẫu phải được thêm vào ở nồng độ cao và thấp, phản ánh phạm vi làm việc dự kiến. Đối với kháng thể phát hiện, thiết lập pha loãng tương tự có thể được thực hiện trong dung dịch pha loãng tiêu chuẩn, dao động từ 1 đến 10 µg/ml đối với các kháng thể chưa được lọc và 0,5 đến 5 µg/ml đối với các kháng thể đã được tinh chế.

Có một loạt các bộ đệm chặn thương mại để lựa chọn, một số trong đó có BSA. Các nhà sản xuất của các bộ đệm này thường cung cấp các giao thức tối ưu hóa rộng rãi. Nếu bộ đệm chặn không được điều chế trước, hãy thử các nồng độ protein khác nhau, chẳng hạn như BSA.

Một số loại mẫu có thể gây ra hiệu ứng ma trận, ví dụ như huyết thanh hoặc huyết tương. Đây có thể được giảm bằng cách pha loãng mẫu. Các chất pha loãng tiêu chuẩn phải phản ánh ma trận của mẫu càng sát càng tốt và kiểm tra độ tuyến tính của các độ pha loãng để đảm bảo phạm vi động tốt.

ELISA thường được thực hiện bằng cách sử dụng các tấm nhiều giếng. Nếu bạn sử dụng pipet cho thí nghiệm ELISA của bạn bằng tay, hãy đảm bảo rằng tất cả các pipet của bạn được hiệu chuẩn tốt. Đó là một thực hành tốt để kiểm tra trực quan rằng mức chất lỏng trong đầu pipet cũng như trong các giếng là ở mức tương tự trong khi hút thử nghiệm của bạn để tránh hiệu suất không nhất quán.

Nếu bạn đang tìm kiếm plate washers hiệu suất cao hơn và hiệu suất nhanh hơn hoặc máy ELISA assay workstations có thể là những bổ sung hữu ích cho quy trình làm việc của bạn. Những công cụ này sẽ giúp bạn tối đa hóa năng suất của bạn và tối ưu hóa tính nhất quán tốt.