NGUYÊN TẮC CƠ BẢN CỦA ELISA

Elisa hoạt động như thế nào?

Xét nghiệm miễn dịch hấp thụ liên kết với Enzyme (ELISA)  là một kỹ thuật phân tử sinh học kết hợp tính đặc hiệu của kháng thể với độ nhạy của xét nghiệm enzyme. Tương tự như các công nghệ xét nghiệm miễn dịch khác, ELISA, dựa vào các kháng thể cụ thể để liên kết kháng nguyên đích. Tính đặc hiệu của tương tác kháng nguyên-kháng thể là yếu tố quan trọng nhất của chiến lược phát hiện ELISA. ELISA tiêu chuẩn thường chạy theo bốn bước.

 

LỚP PHỦ

BƯỚC 1 – LỚP PHỦ

ELISA bắt đầu bằng một bước phủ trong đó tấm ELISA (thường là tấm 96- hoặc 384 giếng) được xử lý bằng dung dịch phủ của kháng nguyên hoặc kháng thể. Kháng nguyên hoặc kháng thể được hấp thụ vào bề mặt tốt của tấm ELISA, tạo ra lớp đầu tiên. Sau đó, lớp đệm được loại bỏ, tiếp theo là một loạt các lần rửa để loại bỏ kháng nguyên hoặc kháng thể không liên kết.

Rửa được lặp lại giữa mỗi bước ELISA để loại bỏ các vật liệu không liên kết. Hơn nữa, điều cần thiết là chất lỏng dư thừa được loại bỏ để tránh pha loãng dung dịch được thêm vào trong bước thử nghiệm tiếp theo. Chúng tôi cung cấp máy rửa microplate tấm chuyên dụng để đảm bảo tính đồng nhất.

 

BƯỚC 2 – KHÓA GIẾNG

In the second step, all free binding sites are blocked using a buffer containing unrelated proteins. This step is important to eliminate a potential source of false positive results. Blocking buffer removal is again followed by a series of washing steps.

BƯỚC 3 – THÊM KHÁNG NGUYÊN PHÁT HIỆN 

Bước này là bước phức tạp nhất của quy trình ELISA vì nhiều lớp kháng thể có thể được sử dụng để khuếch đại tín hiệu. Khay mẫu được ủ với một dung dịch chứa kháng thể phát hiện liên hợp enzyme liên kết đặc biệt với kháng nguyên hoặc kháng thể đích. Tiếp theo là loại bỏ bộ đệm và một loạt các lần rửa khác để loại bỏ tất cả các kháng thể không liên kết.

STEP 4 – CƠ CHẤT THÊM VÀO & PHÉP PHÂN TÍCH

Trong bước cuối cùng, chất nền so màu được thêm vào các giếng tạo thành dung dịch màu khi được xúc tác bởi enzyme. Kết quả được đọc bằng cách sử dụng một máy đọc ELISA or máy đọc microplate.

 

Tìm kiếm nhanh dịch vụ Berthold tại Việt Nam

Office: 11/84 Ngoc Khanh Street, Ba Dinh District, Hanoi VIETNAM

Mr. Mark Pham

Phone: +84 903 114 883

Email: bio@berthold.vn

Liên hệ với chúng tôi ngay hôm nay để tìm hiểu về những sản phẩm đo lường chính xác trong Sinh học Phân Tử và Y Sinh.

 

Liên hệ