ĐỊNH LƯỢNG PROTEIN

Đo nồng độ protein trong dung dịch từ lâu đã trở thành một thao tác quan trọng trong bất cứ phòng thí nghiệm sinh học nào. Các phương pháp thông dụng để định lượng nồng độ protein là Bradford, Lowry và BCA. Tuy nhiên những phương pháp này có một số hạn chế nhất định như độ nhạy, khoảng hoạt động (dynamic range) và trong trường hợp của thí nghiệm Bradford và Lowry (Bradford and Lowry assay) thì còn là vấn đề về khả năng tương thích với chất khử (reducing agents). Phép đo có thể được thực hiện bởi máy quang phổ kế truyền thống (conventional spectrophotometers) hoặc máy đọc khay vi thể (microplate reader).

 

Đối với thí nghiệm có lượng mẫu giới hạn, quá trình định lượng protein thường được tiến hành bằng cách đo độ hấp thụ (absorption) ở 280 nm sử dụng máy quang phổ kế đo thể tích micro (microvolume spectrophotometer). Máy giúp định lượng protein tổng số (total protein) chỉ với một lượng mẫu có thể tích nhỏ bằng 1 µL. Mối tương quan 1 đơn vị O.D. (O.D. unit) = 1 mg/mL protein thường được sử dụng để tính nồng độ hỗn hợp protein ở bước sóng hấp thụ quang bằng 280 nm. Tuy nhiên, đối với protein tinh sạch được biết trước (known purified proteins), việc chia độ hấp thụ quang (absorbance) cho hệ số hấp thụ (absorbance coefficient) của protein thường mang tới kết quả tốt hơn.

 

Mặc dù phần lớn các phòng thí nghiệm sinh học và hóa sinh đã từng sử dụng một trong các phương pháp định lượng protein này nhưng kết quả phát hiện và xác minh một số nồng độ protein đều không thỏa mãn. Phương pháp được tin dùng trong rất nhiều loại thí nghiệm vẫn là đánh dấu proteins bằng huỳnh quang (fluorescent labelling) rồi sau đó ghi nhận những tín hiệu phát ra từ chất đánh dấu này nhờ phép đo phát xạ huỳnh quang (fluorescence measurement). Trong trường hợp này, dòng máy đọc khay vi thể phát xạ huỳnh quang (microplate fluorescence reader) thường được sử dụng.

 

GHI CHÚ ỨNG DỤNG VỀ ĐỊNH LƯỢNG PROTEIN

 

Thí nghiệm định lượng protein SingleQuant (SingleQuant protein quantification assay) bằng máy Colibri

Định lượng protein với thể tích micro (microvolume protein quantification) dựa trên Amido Black (Thí nghiệm SingleQuant) sử dụng quang phổ kế đo thể tích micro Colibri (Colibri Microvolume Spectrophotometer)

PDF | __MB

NỘI DUNG LIÊN QUAN TỚI ĐỊNH LƯỢNG PROTEIN

Định lượng DNA

Tìm kiếm nhanh dịch vụ Berthold tại Việt Nam

Office: 11/84 Ngoc Khanh Street, Ba Dinh District, Hanoi VIETNAM

Mr. Mark Pham

Phone: +84 903 114 883

Email: bio@berthold.vn

Liên hệ với chúng tôi ngay hôm nay để tìm hiểu về những sản phẩm đo lường chính xác trong Sinh học Phân Tử và Y Sinh.

 

Liên hệ